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陸道培醫(yī)院王卉主任:流式細(xì)胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細(xì)胞的專家共識解讀

2021-09-16 17:49 13967

北京2021年9月16日 /美通社/ -- 2021年8月出版的《中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志》上,出了中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會組織專家編寫的《流式細(xì)胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細(xì)胞的專家共識》。這篇共識由河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院王卉主任和中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院劉貴建主任執(zhí)筆并擔(dān)任通訊作者,來自全國30多家三甲醫(yī)院的40多位專家經(jīng)過研究討論共同完成。

 

為了讓大家更好了解這篇共識,王卉主任做了解讀。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)是多種造血及淋巴系統(tǒng)腫瘤和非造血系統(tǒng)腫瘤容易累及的部位,急性白血病中樞累及發(fā)生率30%左右,淋巴瘤累及率5%~25%。腦脊液檢測是評價腫瘤中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累的重要依據(jù)。長期以來認(rèn)為細(xì)胞學(xué)檢查是金標(biāo)準(zhǔn),然而細(xì)胞學(xué)檢查的敏感性較低,特別是在低細(xì)胞含量的樣本中敏感度更低,這些情況可能延誤患者的正確診斷和治療。

流式細(xì)胞術(shù)是上個世紀(jì)70年代問世的重要免疫學(xué)技術(shù),尤其是近30年來在血液和免疫學(xué)領(lǐng)域取得快速進(jìn)展,成為不可或缺的診斷工具。腦脊液檢測方法中,流式細(xì)胞術(shù)幾乎是目前所有技術(shù)中最快速、靈敏、實用的技術(shù),可以極大程度提高腦脊液腫瘤細(xì)胞的檢出率。

鑒于腦脊液這種微量細(xì)胞標(biāo)本的檢測不同于骨髓、外周血等常規(guī)標(biāo)本,為了規(guī)范操作,減少因技術(shù)層面導(dǎo)致的假陰性、假陽性,提高檢測靈敏度和特異性,中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會組織制定了《流式細(xì)胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細(xì)胞的專家共識》(簡稱《共識》)

腦脊液檢測腫瘤細(xì)胞到底有多重要呢?

王卉主任舉了一個例子,十年前一個夜晚,北京一家大三甲醫(yī)院焦急的患者父親送來一份腦脊液標(biāo)本?;純菏前l(fā)熱和頸項僵直的狀態(tài),臨床醫(yī)生首先考慮的是腦膜炎,王卉主任親自進(jìn)行檢測,正常腦脊液中細(xì)胞較少,T淋巴細(xì)胞為主,以及少量單核細(xì)胞,其他細(xì)胞很難見到。該標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)了一群CD45陰性CD56陽性細(xì)胞。首先考慮非造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞可能性大,后來連夜做了更多的標(biāo)志證實為神經(jīng)母細(xì)胞瘤。及時反饋給臨床醫(yī)師,盡快進(jìn)一步完善檢查,最后證實該診斷,患兒獲得及時正確的治療,至今狀態(tài)良好。

該病例腦脊液細(xì)胞數(shù)量增多不明顯,因此其他檢測結(jié)果不能提供幫助,流式成為第一個做出正確診斷提示的技術(shù)。

雖然流式細(xì)胞術(shù)檢測腦脊液非常重要,但是檢測的困難程度限制了該項目的廣泛臨床應(yīng)用。因此專家們就適用范圍、檢測方案、操作中注意事項、發(fā)出合理的報告等幾個方面詳盡提出推薦方法和推薦強(qiáng)度。

共識指出:急性白血病、淋巴瘤、轉(zhuǎn)移癌等多種淋巴造血和非造血腫瘤都有可能累及中樞神經(jīng)系統(tǒng),因此急性白血病、有癥狀的其他腫瘤應(yīng)盡可能進(jìn)行腦脊液的流式細(xì)胞術(shù)檢測。

由于腦脊液無法大量取材,細(xì)胞數(shù)量少,細(xì)胞存活時間短等特點,給該技術(shù)檢測帶來挑戰(zhàn),因此操作和分析過程很重要。

腦脊液標(biāo)本流式細(xì)胞術(shù)檢測的要點在于:

1、采集后盡快低溫送檢。最好不要超過4-8小時送到,實驗室接到標(biāo)本后盡快處理。

2、處理過程中注意回收每一個細(xì)胞,尤其是標(biāo)記、離心、洗滌的過程中,盡量使用尖底EP管或者試管,用吸管或者移液器去上清。

3、注意保持流式細(xì)胞儀的管道清潔。注意體現(xiàn)為日常儀器保養(yǎng),以及上樣前注意沖洗進(jìn)樣針和管道,避免管間污染。

4、方案設(shè)計中,注意覆蓋常見疾病重要診斷相關(guān)標(biāo)志,并且因為胞漿染色處理過程復(fù)雜,容易丟失細(xì)胞,所以盡量使用胞膜抗體替代胞漿抗體,除非細(xì)胞量大,或者不可替代的情況下,才會使用胞漿抗體。

5、獲取前,使用血液標(biāo)本調(diào)整好儀器條件,避免用珍貴的腦脊液標(biāo)本調(diào)整儀器條件。

6、獲取過程中,注意盡可能收集所有腦脊液細(xì)胞。但是也要避免獲空。

7、分析過程中,注意正確識別非特異性染色、死細(xì)胞與真正的細(xì)胞。

8、報告的時候,因為腦脊液標(biāo)本細(xì)胞數(shù)量少,而流式細(xì)胞術(shù)對于細(xì)胞檢測真實性有效性的判斷,一般是要求最少20-25個有效細(xì)胞(特殊情況下,有人提出10個細(xì)胞聚集、背景干凈,可以判斷有效),因此除了報告腫瘤細(xì)胞的比例,還要求給出細(xì)胞數(shù),就是為了準(zhǔn)確判斷腫瘤負(fù)荷和報告的可靠性。比如同樣20%腫瘤細(xì)胞,一個報告是8個細(xì)胞,一個報告是2000個細(xì)胞,前者結(jié)果可信度不高,后者是有效報告。

鑒于臨床實際工作當(dāng)中,大家所用機(jī)型不一致,如四色流式、八色流式、十色流式,甚至20多色的全光譜流式。雖然目前主流機(jī)型是3激光8-10色,但是為了讓共識更具有適用性、可行性、普及性,筆者提供了不同方案供大家選擇。對于這種方案推薦,共識中尊重每一個單位,采取建議參考的方式。

共識中建議大家隨報告提供彩色圖片,因為腫瘤是一個重大疾病,治療過程漫長,患者經(jīng)常會轉(zhuǎn)院和會診,并根據(jù)初治免疫分型進(jìn)行隨訪,所以經(jīng)常會需要報告供同行參考。彩色圖片是提供給同行參考的重要圖像依據(jù)。

總之,流式細(xì)胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細(xì)胞非常重要,為了更好地讓每個有條件的實驗室做好流式細(xì)胞術(shù)檢測腦脊液標(biāo)本,王卉主任和劉貴建主任代表中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會組織眾多行業(yè)內(nèi)著名專家完成了這個共識。希望給臨床醫(yī)師提供快速、準(zhǔn)確的報告,從而讓患者盡早獲得精確診斷和適當(dāng)治療。

王卉主任
王卉主任

王卉個人簡歷

陸道培醫(yī)療集團(tuán)(河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院、北京陸道培醫(yī)院、北京陸道培血液病醫(yī)院)檢驗科副主任(副院長級)、流式細(xì)胞室主任,信納克(北京)生化標(biāo)志物檢測醫(yī)學(xué)研究有限責(zé)任公司主任、CEO、CMO。從事流式細(xì)胞術(shù)檢測20年。取得4項國家發(fā)明專利,2項實用新型專利,3項作品登記。中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會流式細(xì)胞分析診斷專家委員會主任委員;北京醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)會血液和體液檢驗分會副會長;中國非公立醫(yī)療機(jī)構(gòu)協(xié)會血液委員會常委;中國臨床流式聯(lián)盟常委;中國抗癌協(xié)會淋巴瘤學(xué)組委員、中國血液免疫學(xué)會流式學(xué)組委員、中國生物工程學(xué)會細(xì)胞分析專委會委員,等。累計在全國和各省市學(xué)術(shù)會議上講座700余場,足跡遍布全國28個省、自治區(qū)、直轄市(包括臺灣);累計接收進(jìn)修醫(yī)200名,來自全國26個省、自治區(qū)、直轄市(包括臺灣)。獨立簽發(fā)40萬臨床報告,每個月標(biāo)本中40%是來自全國各地的疑難會診病例。

消息來源:陸道培醫(yī)療集團(tuán)
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